Reactiv de transfecție PEI 40K

Reactivul de transfecție PEI 40K (reactiv de transfecție de polietilenimină liniarizat) este un polimer cationic cu o greutate moleculară de 40,000 bazat pe polietilenimină liniarizată, care este încărcat pozitiv și poate lega eficient acizii nucleici încărcați negativ pentru a forma un complex cu le și introduceți-le în celule și este potrivit pentru transfecția ADN-ului plasmidic în celule. Reactivul de transfecție PEI 40K (polietilenimină liniarizată) are citotoxicitate scăzută, eficiență ridicată a transfecției și costuri reduse, ceea ce îl face foarte rentabil în comparație cu reactivii de transfecție pe bază de lipozomi. S-a validat că reactivul de transfecție liniar PEI 40K este utilizat pe scară largă într-o varietate de linii celulare, inclusiv HEK-293, HEK293T, CHO-K1, COS-1, COS-7, NIH/ Celulele 3T3, Sf9, HepG2 și Hela etc., cu eficiențe de transfecție de până la 80% ~ 90%. Concentrația de PEI 40K, componenta principală a acestui produs, este de 1 mg/mL.

Navă cu gheață umedă; Magazin la grade -20 , valabil 6 luni. Sau magazin la 4 grade, valabil 3 luni.

1. Pregătirea înainte de transfecția celulelor aderente (6-placă de godeuri, tabel de referință pentru alte specificații):

A) Cu o zi înainte de transfecție, celulele au fost adecvate pentru a fi plantate uniform în plăcile de pori la un

densitatea adecvată pentru a converge la 70 – 85% la transfecția formală;

B) Înainte de transfecție, mediul celular primar a fost îndepărtat și spălat de 1-2 ori cu PBS înainte de a înlocui 1,8 ml de mediu de bază fără ser sau ser scăzut (sub 5%) sau Opti-MEM; celule diferite au avut dependență de ser diferită în funcție de tipul de celulă specific;

C) Celulele adăugate au fost plasate în incubator și a început prepararea complexelor de transfecție.

2. Celulele în suspensie au fost preparate înainte de transfecție:

A) În ziua transfecției, o cantitate adecvată de celule au fost centrifugate pentru a îndepărta mediul

și resuspendat cu mediu bazal fără ser sau cu ser scăzut (sub 5%);

B) Celulele suspensie preparate au fost plasate în incubator și au început prepararea

complexe de transfecție și raportul de volum dintre complexele de transfecție și mediu ar putea

să fie făcute cu referire la celulele aderente pentru ajustări corespunzătoare.

3. S-au preparat complexe de transfecție:

A) Lichid de preparare A: 100 μL de mediu de bază fără ser și 2 ug de ADN plasmidic, suflare și

amestecat;

B)Prepararea lichidului B: 100 L de mediu de bază fără ser și 6-8 μL PEI 40 K Transfecție

Reactiv, suflare și amestecare;

C) Soluția B a fost adăugată la lichidul A, suflată ușor și amestecată și incubată la temperatura camerei timp de

15 min pentru a forma un complex de transfecție ADN-PEI.

4. Transfected cells:

traversarea sau înconjurarea soluției;

B) Agitați placa „8” sau în alt mod pentru a fi complet amestecată și incubată într-un incubator la 37 de grade, 5% CO2;

C) Complexele de transfecție ADN-PEI cu celule timp de 4 – 6 ore au arătat o eficiență mai bună a transfecției,

extensie adecvată sau incubare peste noapte și eficiență mai bună a transfecției.

1. Vă rugăm să utilizați celule sănătoase în stare bună, iar celulele recuperate se recomandă să fie trecute de cel puțin 2 ori înainte de transfecție.

2. Vă rugăm să utilizați un ADN plasmidic de înaltă calitate, fără endotoxine.

3. Pentru utilizarea inițială, se recomandă distribuirea produsului pentru a evita înghețarea și dezghețarea repetată.

4. Concentrațiile mari de ser la transfecție, precum și utilizarea antibioticelor, pot afecta starea celulei, precum și eficiența transfecției.

5. Diferite toleranță celulară, sensibilitate, durata timpului de incubare a transfecției și raportul de utilizare PEI/ADN au fost ajustate după caz.

6. Vă rugăm să purtați costume experimentale și mănuși de unică folosință în timpul funcționării.

Program: Utilizarea transfectării în diferite recipiente de cultură celulară (doar pentru referință)

Numai pentru cercetare!

Tag-uri populare: reactiv de transfecție pei 40k, China pei 40k reactiv de transfecție producători, furnizori, fabrică