2 X Rapid Pfus PCR Master Mix

Acest Fast Pfus PCR Master Mix este un premix PCR gata de utilizare care conține ADN polimerază Pfu modificată, dNTP și tampon de reacție PCR optimizat la o concentrație de 2x pentru PCR de rutină, PCR de colonie, PCR cu șabloane complexe și șabloane GC ridicate. Amplificarea PCR poate fi efectuată prin adăugarea numai a șablonului, primerilor și ddH2O, astfel încât concentrația de soluție Mix să fie de 1×. Capacitate puternică de amplificare, viteză de amplificare rapidă, viteză de extensie de până la 5-15 s/kb, fidelitate ridicată, specificitate ridicată, produsul de amplificare este plat. Colorantul de încărcare a fost adăugat la produs, iar produsul amplificat poate fi utilizat direct pentru detectarea electroforezei pe gel de agaroză.

Navă cu gheață umedă; Magazin la grade -20 , valabil 12 luni. Evitați înghețarea-dezghețarea repetată.

1. Sistem de reacție PCR recomandat

a: Cantități mai mari de șablon cresc riscul de generare de produse PCR nespecifice. Cantități mai mici de șablon reduc acuratețea amplificării. Dacă șablonul este plasmid sau de la bacteriofag, se recomandă 50 ng-5pg adăugate în 50 μL rnx. Dacă modelat este ADN genomic, se recomandă 250 ng-50ng adăugate în 50 μL rnx. Dacă șablonul este ADNc, diluați ADNc-ul original de 2-100 ori, iar volumul de ADNc diluat adăugat la reacție nu depășește 10% din volumul total de reacție. Dacă templtae este un fluid bacterian sau o probă de extract brut, volumul adăugat la reacție nu este mai mare de 10% din volumul total de reacție. Cantități mai mari de șablon tind să conducă la amplificare nespecifică. Cantități mai mici de șablon tind să conducă la o eficiență scăzută a amplificării PCR.

b: Intervalul de concentrație finală a primerului utilizat este de {{0}}.2-1.0 μM și se recomandă 0,4 μM. Prea puțin primer poate duce la un randament de amplificare scăzut sau deloc și prea mult primer poate duce la o amplificare nespecifică.

c: Pentru șablon cu conținut ridicat de GC, DMSO cu cel mult 10% volum total.

2. Condiții de amplificare PCR recomandate

a: Un timp de pre-denaturare de 30 s este potrivit pentru majoritatea șablonelor convenționale; șabloanele complexe pot fi denaturate timp de până la 2 minute.

b: Pentru amplificarea matrițelor complexe, care conțin primeri concatenați, timpul de recoacere poate fi prelungit până la 30 s.

c: Pasul recomandat de extensie este 5-10 s/kb la 72 de grade pentru șabloanele simple, cum ar fi plasmida ,10-15 s/kb pentru șabloanele ADN genomic de rutină, 15-30 s/kb pentru șabloanele complexe .

1. Când utilizați, vă rugăm să dezghețați și să amestecați bine, după dezghețarea completă poate fi plasat într-o depozitare stabilă la 4 grade cel puțin 2 săptămâni, evitați înghețarea și decongelarea repetată.

2. Pentru siguranța și sănătatea dumneavoastră, vă rugăm să purtați ochelari de protecție, mănuși sau îmbrăcăminte de protecție.

Numai pentru cercetare!

Tag-uri populare: 2 x mix rapid pfus pcr master mix, China 2 x mix rapid pfus pcr master mix producători, furnizori, fabrică