Kit de analiză a viabilității celulare Calcein AM (CCK-F)

 

Numele produsului	Pisică. Nu	Spec.
Calcein AM Cell Viability Assay Kit(CCK-F)	G1609-100T	100T
	G1609-500T	500T

 

 

 

This product, Calcein AM Cell Activity Assay Kit, also known as Cell Fluorescence Counting Kit (CCK-F), is an assay kit to evaluate the activity, toxicity, and proliferation of cells by labeling live cells with Calcein AM fluorescent probe. This kit has been optimized and tuned, not only has high detection sensitivity and wide linear range, but also requires only a short incubation time to complete the detection of cells. It is easy to operate and does not require radioisotope labeling or steps such as crystallization and dissolution, which can reduce the errors caused by experimental operations and improve the accuracy and reproducibility.

 

 

Navă cu gheață umedă; depozitați la -20 grade în întuneric.; Încercați să evitați înghețarea și decongelarea repetate, valabile 12 luni.

 

 

Numărul componentei	Componentă	G1609-100T	G1609-500T
G1609-1	Soluție de Calcein AM	100 μL	500 μL
G1609-2	Tampon de testare CCK-F	10 ml	50 ml
Manual		Un exemplar

 

 

1. Prepararea soluției de lucru Calcein AM

Pentru o placă de cultură celulară 96-godeu, utilizați 100 ul de soluție de lucru calceină AM per godeu. Se prepară o cantitate adecvată de soluție de lucru calceină AM, așa cum este indicat în tabelul următor și se amestecă bine.

 

Componentă	10 teste	50 de teste	100 de teste
Soluție de Calcein AM	10 μL	50 μL	100 μL
Tampon de testare CCK-F	1 ml	5 ml	10 ml

 

2. Detectarea celulelor aderente:

Următorii pași corespund 96-schemei de detectare a plăcilor de godeu, iar alte sisteme de plăci cu godeuri multiple trebuie ajustate în funcție de situație.

o. Însămânțarea celulelor: celulele sunt însămânțate uniform într-o placă de 96-godeuri la o anumită densitate și tratate cu medicamente sau alte tratamente prealabile (densitatea de însămânțare este determinată de factori precum dimensiunea celulei, rata de creștere etc.);

b. (Opțional) Spălarea celulelor: Îndepărtați mediul de cultură și spălați celulele o dată până la două ori cu PBS (recomandat G4202) pentru a îndepărta serul, roșul fenolului și/sau medicamentele care interferează cu testul.

c. Etichetarea sondei: După îndepărtarea mediului de cultură celulară sau a tamponului PBS, adăugați 100 μL de soluție de lucru calceină AM și incubați la 37 de grade timp de 30 de minute la întuneric.

d. (Opțional) Incubarea celulelor: Continuați incubarea timp de 15-30 min cu noul mediu de cultură celulară pentru a vă asigura că Calceina AM intracelulară este complet hidrolizată.

e. Detectarea fluorescenței: După incubare, măsurați fluorescența cu un cititor de microplăci cu fluorescență (lungimea de undă maximă de excitare a sondei Calcein AM este de 501 nm, iar lungimea de undă maximă de emisie este de 521 nm) și calculați viabilitatea celulei. Intensitatea fluorescenței este proporțională cu numărul de celule viabile. Microscopia cu fluorescență poate fi folosită și pentru a observa rezultatele colorării.

3. Analiza celulelor de suspensie:

o. Însămânțarea celulelor: celulele sunt însămânțate uniform într-o placă de 24-godeuri la o anumită densitate și tratate cu medicamente sau alte tratamente prealabile (densitatea de însămânțare este determinată de factori precum dimensiunea celulei, viteza de creștere etc.);

b. (Opțional) Spălarea celulelor: Centrifugați cultura celulară la 1,000×g timp de 3-5 minute, îndepărtați supernatantul și spălați celulele de două ori cu PBS pentru a îndepărta serul, roșul fenolului și/sau medicamentele care interferează cu test.

c. Etichetarea sondei: După centrifugare la 1000 g timp de 3-5 min, îndepărtați mediul de cultură celulară sau tamponul PBS, adăugați o cantitate adecvată de soluție de lucru Calcein AM și incubați la 37 de grade timp de 30 de minute la întuneric;

d. (Opțional) Incubarea celulelor: Continuați incubarea timp de 15-30 min cu noul mediu de cultură celulară pentru a vă asigura că Calceina AM intracelulară este complet hidrolizată.

e. Detectarea fluorescenței: După incubare, măsurați fluorescența cu un cititor de microplăci cu fluorescență sau citometrie în flux (lungimea de undă maximă de excitare a sondei Calcein AM este de 501 nm, iar lungimea de undă maximă de emisie este de 521 nm). Viabilitatea celulară este proporțională cu intensitatea fluorescenței. În funcție de scopul experimentului, nucleele pot fi, de asemenea, contracolorate sau detectate cu alte instrumente, cum ar fi microscopia cu fluorescență.

 

 

1. Centrifugați pentru scurt timp soluția de Calcein AM înainte de utilizare pentru a reduce pierderea de reactiv.

2. Calceina AM se descompune ușor în medii umede. Alicot la primire, sigilați etanș și depozitați la -20 grade .

3. Calceina AM este instabilă în soluții apoase. Soluția de lucru Calcein AM este gata de utilizare și este valabilă pentru utilizare în 24 de ore.

4. Timpul optim de incubare este diferit pentru diferite tipuri de celule, care pot fi ajustate și optimizate în funcție de rezultatele colorării.

5. Folosiți o placă neagră cu mai multe godeuri pentru a crește celulele când este utilizat cititorul de microplăci cu fluorescență pentru măsurare.

6. Coloranții fluorescenți sunt supuși stingerii, manipulați și depozitați departe de lumină.

7. Pentru siguranța și sănătatea dumneavoastră, vă rugăm să purtați ochelari de protecție, mănuși sau îmbrăcăminte de protecție.

 

Numai pentru cercetare!

 

 

Tag-uri populare: Kit de analiză a viabilității celulare calcein am (cck-f), China, kit de analiză a viabilității celulare a calceină am (cck-f), producători, furnizori, fabrică